1.將處于對(duì)數(shù)生長期的CHOK1-Hi細(xì)胞離心重懸至20×10^6個(gè)/ml的密度，震

  蕩培養(yǎng)1小時(shí)后從培養(yǎng)箱中取出進(jìn)行轉(zhuǎn)染；

    2.轉(zhuǎn)染時(shí)直接添加質(zhì)粒至細(xì)胞培養(yǎng)中（按終濃度17ug/ml計(jì)算），充分搖勻

  后，再添加轉(zhuǎn)染試劑（TA-CHO）（添加量按終濃度35ug/ml計(jì)算），充分混勻

  后將其放回培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；

    3.在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5小時(shí)后，以體積為2：1的比例（2份Hi- KDCHO，1份轉(zhuǎn)染

  細(xì)胞懸液）用Hi-KDCHO培養(yǎng)液將轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞稀釋后，放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

   1.轉(zhuǎn)染24小時(shí)后加入細(xì)胞蛋白表達(dá)增強(qiáng)劑KE-CHO和營養(yǎng)補(bǔ)充劑KT-Feed，以

  增加產(chǎn)物表達(dá)量；

   2.待轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞生長至10×10^6個(gè)/ml時(shí)（一般為接種后的1~2天），需每

  天添加1g/L的葡萄糖，若細(xì)胞生長至20×10^6個(gè)/ml時(shí)（一般為接種后的4~6

  天），葡萄糖的添加量可加倍；

   3.轉(zhuǎn)染后第5-7天測(cè)定產(chǎn)物表達(dá)量，客戶可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)及表達(dá)量選擇適宜的收

  獲時(shí)間。

原文鏈接：

更多信息請(qǐng)關(guān)注微信公眾號(hào)：珠海愷瑞生物科技有限公司